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一文詳細(xì)了解單B細(xì)胞抗體制備技術(shù)

發(fā)表時(shí)間:2024-04-18 訪問(wèn)次數(shù):902

  單B細(xì)胞技術(shù)作為新一代的抗體開(kāi)發(fā)技術(shù),是繼雜交瘤技術(shù)、噬菌體展示技術(shù)后的又一抗體表達(dá)方式。通過(guò)單B細(xì)胞技術(shù)可以為我們制備具有高特異性、高活性以及高親和力的抗體,是生物醫(yī)學(xué)研究、診斷以及抗體藥物開(kāi)發(fā)的重要手段。下面,普健生物和大家具體聊聊單B細(xì)胞的相關(guān)技術(shù)。

一文詳細(xì)了解單B細(xì)胞抗體制備技術(shù)

  什么是單B細(xì)胞技術(shù)?

  單B細(xì)胞技術(shù)的原理相對(duì)簡(jiǎn)單,通過(guò)將免疫后的一個(gè)B細(xì)胞提取出來(lái),而后通過(guò)抗體基因擴(kuò)增的方式來(lái)獲得單克隆抗體。

  單B細(xì)胞的制備流程:

  1、動(dòng)物免疫。選擇兔子作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,通過(guò)抗原注射的方式來(lái)刺激免疫反應(yīng),一般在免疫4-5次后,使得其發(fā)生免疫反應(yīng);

  2、單個(gè)B細(xì)胞分離。通過(guò)PBMC流式分選方法從中分選出具備相關(guān)特異性的單個(gè)B細(xì)胞;

  3、單B細(xì)胞培養(yǎng)。對(duì)B細(xì)胞進(jìn)行分選及培養(yǎng),然后將培養(yǎng)的上清液進(jìn)行前期介導(dǎo)檢測(cè);

  4、基因測(cè)序。通過(guò)對(duì)抗體基因可變區(qū)進(jìn)行測(cè)序;

  5、載體構(gòu)建及表達(dá)。進(jìn)行抗體的哺乳表達(dá)載體構(gòu)建,并進(jìn)行相應(yīng)的表達(dá)及蛋白純化工作;

  單B細(xì)胞制備的優(yōu)勢(shì):

  單B細(xì)胞技術(shù)制備的抗體為天然抗體,所得抗體具備更高的親和力、特異性強(qiáng)、可成藥性高,僅需16-20周的時(shí)間即可完成抗體表達(dá)服務(wù);

  相比傳統(tǒng)抗體制備方式來(lái)說(shuō),單B細(xì)胞技術(shù)不僅在特異性上更高,更是具備更強(qiáng)的親和力。而且通過(guò)單B細(xì)胞能夠快速地制備抗體,具備高通量、高效率、高特異性的優(yōu)點(diǎn),在抗體制備上有著極大的優(yōu)勢(shì)。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供抗體制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢。

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