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哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)

服務(wù)簡介

1.載體構(gòu)建

(1)可將cDNA克隆至客戶或者普健生物提供的哺乳細(xì)胞的表達(dá)載體中

(2)可在表達(dá)載體中添加分泌信號肽和純化標(biāo)簽,促進(jìn)蛋白分泌表達(dá)及滿足一步親和純化的需求

(3)能生產(chǎn)并鑒定高效穩(wěn)定細(xì)胞系,適合大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)

2.穩(wěn)定基因表達(dá)符合長期生產(chǎn)需求,整個實(shí)驗(yàn)操作流程提供長期穩(wěn)定及規(guī)??烧{(diào)的蛋白生產(chǎn)

3.瞬時表達(dá)(TGE)

(1)與穩(wěn)定基因表達(dá)相比,TGE主要適用于短期內(nèi)制備重組蛋白,一般在10天內(nèi)即可快速轉(zhuǎn)染,無需質(zhì)粒DNA的遺傳性選擇

(2)普健生物的瞬時表達(dá)使用懸浮細(xì)胞,能夠完成毫升到100L的體積的蛋白表達(dá)

4.工藝過程開發(fā)及擴(kuò)大規(guī)模。普健生物能夠優(yōu)化表達(dá)過程以及表達(dá)產(chǎn)物,預(yù)測細(xì)胞表達(dá)量,摸索發(fā)酵罐發(fā)酵條件,適合大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn)

5.純化:普健生物擁有完善的蛋白純化系統(tǒng),親和純化,凝膠過濾,離子交換及疏水層析等純化方法,能夠完成各類型蛋白的純化,以及純化工藝的摸索

普健生物提供表達(dá)載體構(gòu)建、瞬時轉(zhuǎn)染、表達(dá)測試及大規(guī)模動物細(xì)胞發(fā)酵和蛋白純化等一站式蛋白技術(shù)服務(wù)。

表達(dá)方式

細(xì)胞

瞬時表達(dá)

HEK293,HEK293細(xì)胞來源于293細(xì)胞系,采用無血清懸浮培養(yǎng)CHO-S,CHO-S細(xì)胞是來自中國倉鼠卵巢細(xì)胞的克隆分離株,被馴化為無血清懸浮培養(yǎng)

穩(wěn)定表達(dá)

CHO-K1,CHO-K1由CHO衍生而來,該細(xì)胞株培養(yǎng)條件簡單、貼壁強(qiáng)度適中,比較容易轉(zhuǎn)染

穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建

DG44,DG44 細(xì)胞(二氫葉酸還原酶缺陷型 , DHFR-)由中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞衍生而來,常用于構(gòu)建適合重組蛋白生產(chǎn)的細(xì)胞系。DG44細(xì)胞篩選和共擴(kuò)增標(biāo)記是DHFR基因(dhfr)

    表達(dá)載體:pcDNA3.1, pIRES, pTT3, pCEP4,pATX1等

服務(wù)優(yōu)勢

經(jīng)驗(yàn)豐富:團(tuán)隊(duì)具有十多年豐富的蛋白表達(dá)經(jīng)驗(yàn),累計(jì)完成5000+哺乳表達(dá)項(xiàng)目,200+穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建項(xiàng)目

可提供多種表達(dá)服務(wù): 瞬時轉(zhuǎn)染表達(dá),重組抗體表達(dá)生產(chǎn),穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù)

1.瞬時轉(zhuǎn)染表達(dá):無血清懸浮培養(yǎng)的多種哺乳細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng),自主研發(fā)高產(chǎn)表達(dá)體系,大幅度提高表達(dá)量(3-6倍),同時提供商業(yè)化轉(zhuǎn)染體系為廣大客戶提供多種選擇

2.重組抗體表達(dá):擁有一套經(jīng)過反復(fù)驗(yàn)證的載體-細(xì)胞-轉(zhuǎn)染高效表達(dá)體系,輕松獲得抗體的穩(wěn)定性克級生產(chǎn)

3.穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建:擁有的自主知識產(chǎn)權(quán)的CHO-K1改造細(xì)胞系可提供蛋白及抗體藥物研發(fā)生產(chǎn)服務(wù)

4.十萬級潔凈細(xì)胞房:可提供<0.1EU/ml級別的低內(nèi)毒蛋白表達(dá)服務(wù)/產(chǎn)品

5.大規(guī)模生產(chǎn):無血清懸浮細(xì)胞培養(yǎng)每批次200L+生產(chǎn)

6.一站式服務(wù):基因優(yōu)化、蛋白結(jié)構(gòu)分析與表達(dá)方案設(shè)計(jì),瞬時轉(zhuǎn)染,穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建,重組抗體生產(chǎn)、數(shù)據(jù)分析

服務(wù)內(nèi)容

服務(wù)項(xiàng)目

客戶提供

服務(wù)內(nèi)容

服務(wù)周期

交付內(nèi)容

哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)

基因序列

載體

基因合成

2-3周

基因合成報(bào)告

表達(dá)及純化測試

2周

提供表達(dá)及純化測試報(bào)告

1L表達(dá)及純化

2周

提供蛋白樣品及報(bào)告

搖瓶或發(fā)酵罐放大

2-4周

提供蛋白樣品及報(bào)告

案例展示

HEK293細(xì)胞瞬轉(zhuǎn)表達(dá)病毒跨膜糖蛋白RG

 

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