對于重組蛋白表達(dá)來說，我們常常會在實(shí)驗(yàn)過程中遇到這樣或那樣的問題，最終導(dǎo)致蛋白表達(dá)的效果達(dá)不到我們的預(yù)期。雖然我們通過哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)克服了原核翻譯后修飾表達(dá)的問題，而且通過瞬時表達(dá)和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染等一系列的方法有效地提升了表達(dá)率，但是也因?yàn)槌杀靖?、操作難度大，不適合小型公司的使用。

　　那么，有沒有什么辦法可以提升小規(guī)模重組蛋白表達(dá)效率呢?答案是肯定的。

　　方法一：序列優(yōu)化

　　根據(jù)使用需求，設(shè)計(jì)最佳的編碼序列用于表達(dá)蛋白?？偟膩碚f，就是在開始蛋白表達(dá)之前，我們就通過密碼子優(yōu)化算法以及一些表達(dá)載體選擇，為表達(dá)提供優(yōu)質(zhì)的環(huán)境，這樣能在極大程度上提升蛋白表達(dá)的效率;

　　方法二：提升蛋白溶解度

　　因?yàn)槿芙舛鹊偷膯栴}，也會導(dǎo)致蛋白表達(dá)的效率降低。因此，我們可以通過溫度調(diào)控、培養(yǎng)基選擇、加入一些添加劑等方法來提升蛋白溶解度，以便于提升蛋白的表達(dá)效率;

　　方法三：輔助融合劑使用

　　比如蛋白標(biāo)簽的使用。我們知道，當(dāng)我們將標(biāo)簽蛋白插入到重組蛋白表達(dá)序列上時，蛋白的表達(dá)效率就能夠得到有效的提升，而后再通過酶切或添加化學(xué)試劑的方式切除的方式去除。當(dāng)然了，在選擇之前，我們需要針對特定的表達(dá)系統(tǒng)選擇合適的標(biāo)簽，這個需要結(jié)合多種因素進(jìn)行考慮;

　　方法四：純化方法優(yōu)化

　　針對下游的使用需求和純度需求來設(shè)計(jì)不同的純化方法。一般來說，對于蛋白表達(dá)量高的可以考慮一步式親和純化，如果需要進(jìn)一步純化，可使用親和純化后分子排阻色譜進(jìn)行。當(dāng)然了，在不同情況下，也可以考慮使用離子交互色譜;

　　通過如上的方法，再結(jié)合自己的需求來設(shè)計(jì)，這樣就能在一定程度上提升蛋白的表現(xiàn)率。當(dāng)然了，針對不同的情況，還可以適當(dāng)?shù)脑黾右恍┢渌椒?，畢竟不同的使用環(huán)境下，方法也是各不相同的。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供重組蛋白表達(dá)服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。