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盤點(diǎn)SPR抗體親和力成熟的幾種常用策略

發(fā)表時間:2023-01-17 訪問次數(shù):1321

  抗體親和力成熟的概念在我們進(jìn)行相關(guān)抗體制備的過程中常常會用到,這個技術(shù)能在一定程度上解決抗體質(zhì)量方面的問題,也能提升表達(dá)的效率。而想要實(shí)現(xiàn)抗體親和力成熟,必須對天然抗體有充分的了解,同時知道其體內(nèi)成熟的原理,然后通過模擬天外可能出現(xiàn)和存在的一些變化,從而通過相關(guān)條件來促進(jìn)抗體的體外成熟。

  對于天然抗體來說,親和力成熟一般分為體細(xì)胞高頻突變和克隆選擇兩個過程,想要抗體出現(xiàn)親和力成熟,抗原的刺激起著至關(guān)重要的作用。所以,我們在進(jìn)行體外抗體親和力成熟時,也常常會利用到相關(guān)策略。下面,普健生物就和大家具體聊聊有關(guān)抗體體外親和力成熟的幾個策略。

  策略一:隨機(jī)突變

  1、錯配PCR。通過改變PCR的反應(yīng)條件,從而提升核酸發(fā)生錯配的幾率,最終將隨機(jī)突變引入到基因序列中;

  2、DNA改組。通過對抗體基因進(jìn)行脫氧核酸酶I切片,隨后在進(jìn)行PCR擴(kuò)增,從而完成抗體基因的突變;

  3、鏈改組。也叫鏈天技術(shù),其中一條輕重鏈不變,但是對另外一條輕重鏈進(jìn)行重組和配對,從而提升抗體親和力(通常會將噬菌體展示技術(shù)與此技術(shù)結(jié)合使用);

  策略二:定向引入

  也叫CDR重組。在抗體親和力成熟的過程中,細(xì)胞內(nèi)的高頻突變區(qū)并非均勻分布,而是主要集中在直接接觸的部位。因此,這樣既能獲得足夠多的突變多樣性,又不會破壞蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。所以,我們可以通過在CDR區(qū)引入多個抗體,再通過抗體庫進(jìn)行CDR區(qū)的多次重組,這樣就能達(dá)到親和力成熟的目的;

  所謂的抗體親和力成熟的過程,其實(shí)就是一個體外分子進(jìn)化、多樣化和擴(kuò)增的過程,這個過程能夠得到高親和力的抗體,使得低劑量藥劑要過增強(qiáng)的作用??贵w親和力成熟,能增加治療效果,減少各種毒副作用,在抗體藥物研發(fā)過程中有著至關(guān)重要的作用。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供SPR抗體檢測服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來電咨詢。

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