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雌激素受體（ER）是正常乳腺發(fā)育和功能的調(diào)節(jié)因子。它在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展中也起著重要作用，約80%的浸潤(rùn)性乳腺癌表達(dá)ER。
由于雌激素受體（ER）狀態(tài)是預(yù)測(cè)激素治療反應(yīng)的一個(gè)至關(guān)重要的變量，因此評(píng)估雌激素受體（ER）表達(dá)的實(shí)驗(yàn)室方法備受關(guān)注。在過(guò)去的幾十年里，免疫組織化學(xué)(IHC)已經(jīng)被廣泛接受用于檢測(cè)乳腺癌標(biāo)本中福爾馬林固定，石蠟包埋(FFPE)組織中的雌激素受體（ER）。近年來(lái)，免疫組織化學(xué)方法有了一些顯著的改進(jìn)。這些包括引入基于聚合的檢測(cè)方法，通過(guò)降低內(nèi)源性生物素的非特異性結(jié)合和增強(qiáng)敏感性來(lái)提高染色質(zhì)量。與此同時(shí)，一抗的產(chǎn)生和生產(chǎn)技術(shù)取得了進(jìn)展，兔多克隆抗體已被鼠單克隆抗體所取代，最近還被兔單克隆抗體所取代。在過(guò)去的幾年中，兔單克隆抗體在ER IHC檢測(cè)中的應(yīng)用已經(jīng)開(kāi)始實(shí)施，旨在通過(guò)引入新的高靈敏度、特異性和穩(wěn)健的試劑來(lái)不斷提高檢測(cè)質(zhì)量。
研究人員報(bào)道了一種新的抗雌激素受體(ER)α的兔單克隆抗體EP1的特性。此外，在正常組織和兩個(gè)不同的乳腺癌患者隊(duì)列中評(píng)估了其在存檔組織中的免疫組織化學(xué)表現(xiàn)特征。
方法:將EP1與ER/PR pharmDx試劑盒(小鼠單克隆抗體克隆1D5和ER-2-123的混合物)中的抗ERα組分進(jìn)行比較，并與另一種已上市的兔單克隆抗體克隆SP1進(jìn)行比較。
結(jié)果:克隆EP1在所有檢測(cè)的組織中均能特異地檢測(cè)到核內(nèi)ER;未見(jiàn)細(xì)胞質(zhì)染色。EP1與Dako ER/PR pharmDx試劑盒和Ventana克隆SP1的ERα組分具有高度的一致性(約95%)。然而，與使用Ventana ultraView DAB檢測(cè)系統(tǒng)的SP1抗體相比，使用EP1抗體和Dako EnVision FLEX檢測(cè)系統(tǒng)產(chǎn)生了更強(qiáng)的染色強(qiáng)度，從而獲得更好的“易用性”。
結(jié)論:使用EPI可以更好地解讀ER分析結(jié)果。
這項(xiàng)研究記錄了兔單克隆抗人ERα克隆EP1是一種高靈敏度和特異性抗體，用于通過(guò)IHC檢測(cè)ERα。在對(duì)大量乳腺癌病例的多次比較中，與其他已建立的 ER 抗體測(cè)定相比，克隆 EP1 與 Dako Autostainer Link 系統(tǒng)和 FLEX 方案一起使用時(shí)，將高度可比數(shù)量的病例識(shí)別為 ER 陽(yáng)性或 ER 陰性。使用EP1也有助于解釋?zhuān)嗟牡完?yáng)性病例顯示出更強(qiáng)的強(qiáng)度和更高的陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞比例。
單B細(xì)胞技術(shù)是兔單克隆抗體發(fā)現(xiàn)主要途徑之一，兔單克隆抗體具有高親和力、高特異性、高靈敏度，可識(shí)別更多新型表位，容易人源化等特點(diǎn)，兔單克隆抗體開(kāi)發(fā)用于抗體藥物治療的前景非常廣闊。普健生物兔單克隆抗體的制備服務(wù)選用最新的single B篩選路線，從免疫兔脾組織或外周血中分離抗原特異性B細(xì)胞，通過(guò)單細(xì)胞PCR技術(shù)從分泌抗體的單個(gè)B細(xì)胞中擴(kuò)增IgG重鏈和輕鏈可變區(qū)基因，然后進(jìn)行重組表達(dá)，獲得大量具有生物活性的單克隆抗體。
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案例展示
參考文獻(xiàn)：
EP1: a novel rabbit monoclonal antibody for detection of oestrogen receptor α,Comparative Study J Clin Pathol. 2013 Dec;66(12):1051-7. doi: 10.1136/jclinpath-2012-201391. Epub 2013 Jul 26.
