1993年比利時科學(xué)家Hamers在駱駝體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了天然重鏈抗體，其重鏈可變區(qū)VHH(the variable domains of the heavy chain of heavy chain only antibodies)能夠克服傳統(tǒng)全長抗體組織穿透性差、免疫原性強(qiáng)等缺陷。VHH即納米抗體(Nanobody，Nb)具有高親和力、特異性強(qiáng)、分子量小、低免疫原性和高水溶性等特點。然而靶向單一抗原可能會由于免疫逃逸等難以滿足療效。
雙特異性納米抗體(bispecific nanobody, BsNb)能夠同時識別兩種不同的抗原或者表位,相比于納米抗體具有更強(qiáng)的特異性、靶向性和更低的脫靶毒性,在治療中體現(xiàn)出雙靶點信號阻斷、降低免疫逃逸與耐藥性的優(yōu)勢。通過基因工程對納米抗體進(jìn)行雙特異性抗體設(shè)計,再借助計算機(jī)模擬進(jìn)行體外親和力成熟從而獲得高親和力抗體序列。雙特異性納米抗體靶標(biāo)結(jié)合力的增強(qiáng)和血清半衰期的延長可使其效能得到提高,在感染、腫瘤及免疫領(lǐng)域診斷與治療中已成為研究熱點。

納米抗體的CDR3區(qū)增長并具有“凸形”結(jié)構(gòu)，作為抗原識別位點可抑制載脂蛋白L-1 酶活性殺滅錐體蟲，治療非洲錐蟲病。根據(jù)其高穩(wěn)定性特點，Ren等制備出識別特定肽標(biāo)記的納米抗體，用于親和層析技術(shù)而提升蛋白質(zhì)純化效率，為高效純化提出新的策略。納米抗體表面親水不與輕鏈結(jié)合而易聚合，利用基因工程可將兩種針對腫瘤不同靶標(biāo)的納米單體構(gòu)建出雙特異性抗體用于提升抗腫瘤抗體的特異性。安進(jìn)設(shè)計出用連接肽將納米抗體與重鏈抗體的N端遺傳融合的雙特異性重鏈抗體BiTE，可同時與T細(xì)胞和病變細(xì)胞結(jié)合，增強(qiáng)T細(xì)胞殺傷作用特異性。

盡管單價納米抗體分子量小對穿透組織有利，但也使其在血清中的半衰期較短導(dǎo)致易被快速清除而難以發(fā)揮療效。納米抗體與白蛋白融合或多聚納米抗體可延長其血清半衰期以改善其藥代動力學(xué)特征，在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病的治療中有著潛在的應(yīng)用價值。例如，白蛋白結(jié)合雙特異性納米抗體構(gòu)建的ALX-0061和ATN-103(Ozoralizumab)，可以分別靶向白介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)從而達(dá)到療治類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的目的。

參考文獻(xiàn)
YUAN Bo,WANG Jie-wen,KANG Guang-bo,HUANG He. Research Progress and Application of Bispecific Nanobody. China Biotechnology, 2021, 41(2/3): 78-88.

 

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