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盤點(diǎn)重組蛋白純化時(shí)常用的幾種方法

發(fā)表時(shí)間:2024-02-06 訪問次數(shù):1063

  在“重組蛋白之蛋白純化的原理與步驟”一文中,我們和大家詳細(xì)介紹了蛋白純化的相關(guān)原理和具體步驟,相信大家對(duì)蛋白純化也有了初步的了解。那么,有關(guān)重組蛋白純化的方法您了解多少呢?今天,普健生物就在這里和大家具體聊聊。

蛋白純化

  我們知道,不同的蛋白在物理、化學(xué)、生物活性等方面都有著極大的不同,因?yàn)槠浒被嵝蛄泻蛿?shù)量的不同,連接氨基酸殘基可能是荷正電也可能是荷負(fù)電的、極性或是非極性的、親水或是疏水的。所以,我們完全可以根據(jù)它們的這些特點(diǎn)來(lái)對(duì)其進(jìn)行相關(guān)純化工作。

  方法一:超速離心法

  超速離心法主要用于分離亞細(xì)胞和蛋白,利用個(gè)例子在梯度液中沉降速度不同的原理,使得不同沉降速度的顆粒處于不同密度的梯度層中,從而達(dá)到分離的目的;

  方法二:選擇性沉淀法

  選擇性沉淀法其實(shí)就是利用各種沉淀劑或者通過(guò)改變某些條件來(lái)促使分層沉淀,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)蛋白的純化。

  常用的方法有鹽析沉淀法、有機(jī)溶劑沉淀法、水溶性非離子型聚合物沉淀法等方法來(lái)實(shí)現(xiàn)蛋白純化操作,具體方式及其優(yōu)劣我們將在后文中和大家詳細(xì)介紹;

  方法三:凝膠層析法

  凝膠層析法也被稱為分子篩過(guò)濾法,其實(shí)就是利用分子大小的不同,將蛋白分離出來(lái)。相比其他方法來(lái)說(shuō),凝膠沉淀法操作相對(duì)溫和,對(duì)蛋白造成的影響相對(duì)要小一些;

  方法四:離子交換層析法

  離子交換層析法是利用分子所含電荷的吸附作用不同來(lái)實(shí)現(xiàn)。我們和大家提到過(guò),蛋白的等電點(diǎn)不同,其所帶電荷量也是各不相同的,所以,通過(guò)在纖維素上加入電荷位置,從而實(shí)現(xiàn)吸附蛋白的效果;

  方法五:親和層析法

  親和層析法其實(shí)就是利用生物大分子的特異性,類似親和力結(jié)合的方式來(lái)實(shí)現(xiàn)蛋白的吸附;

  總的來(lái)說(shuō),上面五種方法所針對(duì)的方面不同,其實(shí)也是針對(duì)各類蛋白在大小、特性等方面的不同來(lái)實(shí)現(xiàn)蛋白的純化操作。對(duì)于不同的純化需求來(lái)說(shuō),五種方法可謂各具優(yōu)勢(shì),需要有選擇地進(jìn)行選擇。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供重組蛋白純化服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢。

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